細胞基因編輯服務
項目介紹
基因編輯是指通過特異性改變目標基因序列以獲得期待的生物性狀的手段。百維斯生物依托先進的技術和專業的科研團隊，根據客戶需求和要求幫助客戶構建相關載體、檢測編輯效率及篩選基因編輯單克隆。在整個項目過程中，百維斯生物專業的項目管理專員，將密切跟蹤項目，并階段性的給客戶提供更新、咨詢以及售后服務。
服務內容
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服務項目 |
服務內容 |
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CRISPR/Cas9 敲除細胞系構建 |
CRISPR/Cas9 系統利用 sgRNA/Cas9 復合體識別并在 DNA 特異位點造成雙鏈斷裂，利用細胞自身修復機制或者與外源 DNA 同源重組實現基因敲除。 |
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過表達穩轉細胞系構建 |
將目的基因定點整合到基因組的經過篩選的高表達活性位點中，這些位點不僅安全而且基因表達量高，可以實現目的基因過表達，并能長期穩定遺傳。實驗周期短（3-6 周），整合效率高。對于不同長度的基因的整合，能達到一致整合效率，并可同時整合多個基因。 |
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CRISPR/CasRx 敲降細胞系構建 |
是指通過降解具有同源序列靶基因的mRNA，達到阻止基因表達的作用。百維斯生物創新的CRISPR/CasRx knockdown 技術，能夠識別所有的目標RNA，不需要特異的序列元件，具有操作容易、可以同時靶向多個靶點的優勢，可以實現目的基因的敲降研究。 |
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IOS 誘導表達細胞系構建 |
Tet-Off/Tet-On 系統是比較成熟的真核生物外源基因誘導表達系統之一,具有高效、無毒、開/關較嚴密等特點，已被成功地應用于細胞和轉基因小鼠基因誘導表達的研究。 |
技術流程
案例展示
CLCA2過表達的抑制子宮頸癌細胞的遷移
常見問題
1. 如何進行細胞RNA 提??？
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Trizol 是一種單相溶液，由苯酚和異硫氰酸胍等組成。通過加入Trizol，能破壞細胞和溶解細胞成分，利用氯仿的萃取得到上層水相（含RNA）、界面層和下層的紅色有機相（含DNA和蛋白）。得到的水層用異丙醇沉淀并經過酒精的洗滌去除雜質，能分離大小不一的各種RNA。
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用途：RT-PCR、分子克隆、Northern-Blot、RNA體外轉錄與翻譯等。
2. 什么是細胞轉染？
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細胞轉染是指將外源分子如 DNA、RNA、蛋白質等導入到真核細胞的技術。隨著基因和蛋白功能的深入研究，轉染已經成為科研實驗中最常用的技術手段之一。目前常用的轉染方法有陽離子聚合物轉染、脂質體轉染、電穿孔和病毒感染，不同的轉染方法各有利弊，沒有一種轉染試劑是普遍適用的，我們需要依據自己的實驗需求選擇合適的轉染技術及轉染試劑，才有可能得到理想的實驗結果。