斑馬魚藥物篩選和評價
項目介紹：
斑馬魚模型由于特殊的生理優勢被逐漸應用于藥物篩選和安全性評價，與哺乳動物相比，斑馬魚實驗成本相對較低，試驗周期短（48小時），樣品用量少（微克級）、結果觀察容易（幼魚通體透明）、體外發育，繁殖力強，適合于大規模的篩選。同時藥物暴露（異種生物、激素、藥物以及環境污染物）能夠引起斑馬魚出現與哺乳動物類似的生理反應和病理響應。
斑馬魚藥物篩選和評價的應用方向主要有：
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篩選和確認毒性部位及成分
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確定藥物的毒性靶器官及其毒性機制
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闡釋毒性-代謝關系
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潛在藥物的毒性篩選和評價
服務內容
? 藥物高通量體內篩選
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藥物庫篩選、定制（中藥新藥、化學小分子、天然產物） |
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老藥新用、藥物新特性篩選 |
? 一站式藥效學快速評價
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腫瘤 |
抗血管生成藥物高通量體內篩選；抗血管生成藥物藥效學評價 斑馬魚人類癌癥移植模型評價抗癌藥物藥效；抗細胞增殖藥物篩選模型；凋亡模型 |
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眼科 |
眼部血管新生模型（用于老年視黃斑變性、糖尿病視網膜變性等領域） |
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骨科 |
骨質疏松模型（用于抗骨質疏松藥物評價） |
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耳鼻喉科科 |
聽細胞（毛細胞）保護劑篩選模型（用于聽力保護劑及促聽力再生藥物開發） |
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中樞神經 |
腦細胞凋亡保護劑評價模型（用于急性腦梗塞藥物開發） |
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消化系統 |
膽管閉鎖模型 |
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脂類代謝 |
磷脂酶 A2 抑制劑篩選模型 |
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皮膚色素 |
美白護膚產品效枅評價，抗色素藥物篩選 |
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組織再生 |
鰭再生模型 |
? 藥物毒性與安全性評價
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急性毒性（LC50） |
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胚胎毒性（OECD 標準） |
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發育毒性、不致畸性 |
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心血管毒性 |
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肝臟毒性 |
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神經毒性 |
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皮膚和肌肉毒性 |
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聽毒性 |
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骨毒性 |
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凋亡 |
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納米材料毒性 |
案例分析
應用案例
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快速分析藥物的胚胎毒性，心臟等靶器官毒性分析
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胚胎死亡率-濃度曲線及形態學觀察
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斑馬魚心臟毒性觀察
常見問題
1. 斑馬魚對常見有機溶劑的耐受性
研究表明，斑馬魚胚胎和仔魚對DMSO、DMF、乙醇、丙酮等的耐受性為0.5-2.5%(孵育時間為24小時)。以DMSO為例。一般在細胞實驗中不超過0.1%，而斑馬魚胚胎和仔魚通常暴露在高達1%的DMSO中。在斑馬魚毒性實驗中，胚胎對2.5% DMSO有很好的耐受性。友情提醒，在大多數胚胎孵化中，最終DMSO濃度仍控制在0.1%以下。
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2. 怎么確定半數致死濃度LC50
LC50是指在動物急性毒性實驗中，使受試動物半數死亡的毒性濃度。
將供試品設置一系列濃度，并設置一個正常對照組，每組設置3個生物學重復。藥物通過溶解到養魚用水中或灌胃的方式讓斑馬魚攝入，進行一定時間的暴露實驗。
每天觀察記錄斑馬魚死亡情況，藥物處理結束后，統計各實驗組的斑馬魚致死率，使用統計學軟件繪制最佳的劑量效應曲線，并計算LC50。
3. 怎么用斑馬魚評價藥物的發育毒性與致畸性風險
將受測試斑馬魚胚胎進行分組，其中正常對照組未攝入待測藥物或者僅攝入藥物溶劑，藥物組根據LC50濃度攝入了不同濃度（通常設置3個濃度梯度）的待測藥物。
在藥物暴露過程中，每天觀察記錄各個濃度組斑馬魚的死亡情況，并及時挑走死魚。統計斑馬魚死亡情況并使用軟件擬合數據曲線，獲得藥物的最大非致死濃度（MNLC）和LC10。藥物暴露結束后，觀察記錄斑馬魚身體各個指標的情況并對典型毒性器官進行顯微拍照。
