斑馬魚腫瘤移植模型
服務介紹
通過構建腫瘤移植斑馬魚模型，能夠可靠的重現多種病人來源的腫瘤生長，轉移和凋亡情況。斑馬魚通體透明的特點決定該模型能方便使用熒光標記進行腫瘤研究。通過將斑馬魚模型用于臨床前治療效果的檢測，能夠快速進行腫瘤體內分析實驗，為腫瘤病人的個性化治療奠定基礎。
腫瘤細胞體內增殖情況流程圖
腫瘤細胞體內藥效分析轉移流程圖
斑馬魚腫瘤異種移植優勢
斑馬魚作為移植接受者，具有許多固有的特征使它成為理想的移植接受者。
1. 通過熒光標記移植細胞，可以很容易地追蹤移植的正?；驉盒约毎?，并且使用光學透明的斑馬魚品系作為受體，可以直接觀察移植情況。
2. 斑馬魚高度多產，成熟的雌性每周能產生數以百計的卵且很小，成千上萬的斑馬魚可以保存在一個容器里，管理和維護成本相對較低于大、小鼠。當斑馬魚模型與大規模遺傳篩選和藥物發現平臺相結合時，這些研究為腫瘤內克隆、進化和異質性、治療耐藥、侵襲和轉移、造血和干細胞移植提供了有價值的見解。
技術流程
腫瘤細胞體內增殖技術流程
應用案例：
1. 利用斑馬魚人源腫瘤移植模型，進行不同放化療方案抗腫瘤效果分析，通過分析移植后1dpi和3dpi的熒光情況，得到CG/DOX+5Gy組對腫瘤殺傷顯著高于其他組，實驗周期不到1周。
備注：與對照組相比，CFSE熒光>5%、0-5%和熒光降低分別導致HeLa細胞數量增加、不變和減少。
2. 分析CAR-T對Raji細胞的轉移灶殺傷效果，通過卵黃囊間隙顯微注射，構建人源腫瘤移植模型，實驗組同時注射CAR-T細胞，注射后24h，分析斑馬魚頭部、軀干和尾部的腫瘤熒光面積，可見對轉移到析斑馬魚頭部、軀干和尾部的Raji細胞殺傷效果顯著。
參考文獻：
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常見問題
1. 斑馬魚胚胎顯微注射實驗操作方法
斑馬魚顯微注射是將實驗材料直接注射到1-4細胞期的斑馬魚胚胎中，由于在這個胚胎發育早期沒有膜分隔細胞和卵黃，注入1個細胞或卵黃的溶液將擴散到整個胚胎中。通過注射不同類型的實驗樣品，實現基因的瞬時過表達、敲降、以及制備轉基因或突變斑馬魚品系等研究。
2. 顯微注射的注意事項
顯微注射的操作過程中有許多細節影響實驗的成功率，主要包括以下幾方面。
1) 注射樣品的質量和和濃度，注射劑量1nl/embryo。
2) 注射前小心將顯微注射針定位，注射針定位到卵表面的注射角度是穿透堅硬的卵殼注射成功的關鍵。
3) 破針時，將針尖一點點剪斷，不宜一次剪太多。
4) 注射時注射器的壓力不宜變化太快，否則會造成注射量操作難以控制，導致胚胎內環境改變過快過大甚至脹破細胞。氮氣罐的壓力閥顯示氣體的壓力，壓力為0表明罐內無氣體，需要及時換氣。
5) 注射完畢，慢慢抽出注射針，避免受精卵內物質隨著毛細針抽出，造成受精卵的損傷。
6) 注射后的胚胎需要細心照顧，控制溫度、水質和養殖密度。
